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关于Tn5转座酶的原理介绍

发布时间:2022-09-15   点击次数:36次
  RNA测序(RNA-Seq)是基于二代测序技术开展转录组学研究过程中广泛使用的一种方法,能够在特定时间点对生物样本中的多种RNA进行定性和定量分析。针对RNA测序的常规建库方法都需要先将RNA转换为双链DNA,且需经过目标RNA富集及片段化、双链DNA合成、接头连接、PCR扩增等多个步骤。
  Tn5转座酶复合体因能一步打断双链DNA并且使DNA两端带上接头,而广泛应用于二代测序建库等领域。近期也有研究发现,Tn5转座酶同样能以类似的方式作用于RNA/DNA杂合链,从而能够省去传统RNA建库技术中的RNA片段化、二链合成等繁琐的操作步骤,进一步拓展了Tn5转座酶的新用途。此外,Tn5转座酶也被广泛用于体外转基因(外源基因整合到宿主细胞)等各领域。
  执行转座功能的酶,通常由转座子编码,识别转座子两端的特异序列,能把转座子从相邻序列中脱离出来,再插入到新的DNA靶位点,无同源性要求。
  EZ-Tn5™转座酶具有较高的Tn5转座活性。是高纯度,单亚基的酶,可随机插入EZ-Tn5至任何靶向DNA,每个标准反应插入DNA克隆的量为>106,当用EZ-Tn5转座子在没有镁离子孵育时,形成稳定的EZ-Tn5转座子复合体,特定的认识自然发生的Tn5和微小的Tn5转座反应和使EZ-Tn5转座子具有高活性的端端序列。

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