关于Tn5转座酶的原理介绍

　　RNA测序（RNA-Seq）是基于二代测序技术开展转录组学研究过程中广泛使用的一种方法，能够在特定时间点对生物样本中的多种RNA进行定性和定量分析。针对RNA测序的常规建库方法都需要先将RNA转换为双链DNA，且需经过目标RNA富集及片段化、双链DNA合成、接头连接、PCR扩增等多个步骤。

　　Tn5转座酶复合体因能一步打断双链DNA并且使DNA两端带上接头，而广泛应用于二代测序建库等领域。近期也有研究发现，Tn5转座酶同样能以类似的方式作用于RNA/DNA杂合链，从而能够省去传统RNA建库技术中的RNA片段化、二链合成等繁琐的操作步骤，进一步拓展了Tn5转座酶的新用途。此外，Tn5转座酶也被广泛用于体外转基因(外源基因整合到宿主细胞)等各领域。

　　执行转座功能的酶，通常由转座子编码，识别转座子两端的特异序列，能把转座子从相邻序列中脱离出来，再插入到新的DNA靶位点，无同源性要求。

　　EZ-Tn5™转座酶具有较高的Tn5转座活性。是高纯度，单亚基的酶，可随机插入EZ-Tn5至任何靶向DNA，每个标准反应插入DNA克隆的量为>106，当用EZ-Tn5转座子在没有镁离子孵育时，形成稳定的EZ-Tn5转座子复合体，特定的认识自然发生的Tn5和微小的Tn5转座反应和使EZ-Tn5转座子具有高活性的端端序列。