双荧光素酶报告实验（Dual-LUC）

技术简介

双荧光素酶报告实验（Dual-luciferase reporter assay，DLR）是一种在生物学研究中广泛应用的技术，主要用于解析基因表达调控机制，可定量评估转录因子与靶基因启动子的相互作用及启动子活性。

技术原理

该实验通常使用萤火虫荧光素酶（Firefly Luciferase）和海肾荧光素酶（Renilla Luciferase）双报告系统：

萤火虫荧光素酶基因常作为报告基因，与目标基因的启动子序列构建在同一载体上，其表达直接受目标启动子调控。

海肾荧光素酶基因作为内参基因，由组成型启动子驱动，在细胞内稳定表达。

当细胞同时转染含有这两种基因的载体后，加入相应的荧光素底物，两种荧光素酶会催化底物发光。通过检测两种荧光信号的强度比值（Luc/Ren），可归一化处理实验数据，消除细胞转染效率、细胞活性等因素对实验结果的影响，从而准确反映目标启动子的活性。

适用场景

转录因子与调控序列的互作验证

miRNA与靶mRNA的互作验证

miRNA与IncRNA的靶向互作验证

转录因子调控活性分析

启动子活性检测

启动子结构功能分析

启动子单核苷酸多态性(SNP)分析

技术流程

结果示例