DAP-seq助力揭示茶树CsMYB82介导的炭疽病抗性调控网络

文献题目：Regulatory Mechanism of CsMYB1-CsMYB82/CsbHLH48-CsCAD4 Model for Resistance Against Colletotrichum gloeosporioides in Camellia sinensis

发表期刊：Plant Biotechnology Journal

影响因子：12.8

物种：茶树

发表时间：2026年4月3日

发表单位：南京农业大学

蓝景科信提供：DAP-seq技术服务

图1. DAP-seq技术对CsMYB82结合靶基因及结合位点的检测结果。（A）CsMYB82结合位点分布；（B）转录起始位点（TSS）处峰分布，并分析两种重复实验方法所得峰数据的一致性；（C、D）CsMYB82结合靶基因的GO（C）与 KEGG（D）功能注释分析；（E）采用MEME软件包确定CsMYB82结合位点中显著富集的基序序列，E值表示相应基序的统计学显著性。

图2. CsMYB82与CsbHLH48协同激活CsCAD4表达及其在茶树炭疽病抗性中的作用。（A）双荧光素酶报告实验效应器与报告载体的构建示意图。（B）荧光素酶（Luc）检测显示，CsMYB82在烟草叶片中激活CsCAD4启动子活性；CsMYB82与CsbHLH48共表达时对CsCAD4启动子的激活作用更强。（C）烟草叶片中相对LUC/REN表达量。CsMYB82与CsbHLH48共转化可激活CsCAD4启动子活性；CsMYB82对CsCAD4的DNA结合活性在CsMYB82与CsbHLH48形成异源二聚体后进一步增强。（D）酵母单杂交（Y1H）实验表明，CsMYB82特异结合ProCsCAD4，而CsbHLH48不能结合。（E）接种胶孢B.a后24、48、72小时，通过RT-qPCR分析CsCAD4的表达变化。（F）‘龙井43’叶片中，pTRV：CsCAD4叶片接种B.a后3天和5天的病害症状。（G）‘中茶108’叶片中，OE-CsCAD4叶片接种B.a后3天和5天的病害症状。（H）pTRV：CsCAD4、OE-CsCAD4及野生型（WT-LJ43、WT-ZC108）叶片在接种后3天和5天的病斑面积。（I）浸润后72小时，pTRV：CsCAD4、OE-CsCAD4及野生型（WT-LJ43、WT-ZC108）叶片中CAD酶活性的比较。（J）浸润后72小时，pTRV：CsCAD4、OE-CsCAD4及野生型（WT-LJ43、WT-ZC108）叶片总木质素含量的测定。（K）通过Phlo-HCl染色观察‘龙井43’和‘中茶108’叶片中pTRV：CsCAD4、OE-CsCAD4及对照叶片的木质素积累情况。