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电泳迁移率检测是转录因子研究的经典方法

发布时间:2021-06-27   点击次数:557次
  带电粒子在单位时间内移动的距离称为电泳迁移率。凝胶迁移或电泳迁移率检测(ElectrophoreticMobilityShiftAssay,EMSA)是一种检测蛋白质和DNA序列相互结合的技术,可用于定性和定量分析;目前已用于研究RNA结合蛋白和特定的RNA序列的相互作用,是转录因子研究的经典方法。
  凝胶迁移实验又称凝胶阻滞实验或电泳迁移率实验(EMSA,electrophoreticmobilityshiftassay),是目前研究核酸与蛋白质相互作用的一种重要实验手段,常用于转录因子与启动子相互作用的验证性实验。该实验利用核酸与蛋白结合后,在非变性聚丙烯酰氨凝胶中电泳的迁移速率会明显降低的原理,通过设计特异性和非特异性的探针,通过孵育与目标蛋白结合,形成探针-蛋白复合体,由于分子量变大,在聚丙烯酰氨凝胶中的电泳迁移速率下降,相比于未结合的探针会出现滞后效应,再通过探针上特殊的标记物性质,通过转膜、显色或曝光,探针-蛋白复合体所在的位置便能形成条带,从而证明核酸与蛋白的相互作用。目前随着实验技术的改进,能够定性和定量的完成实验。
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