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介绍EMSA的工作原理

更新时间:2022-03-28   点击次数:1038次
  EMSA全称是ElectrophoreticMobilityShiftAssay,中文叫凝胶迁移实验或电泳迁移率实验,它是一种研究DNA与蛋白质或RNA与蛋白质相互作用的常用技术,可用于定性和定量分析。
  这项技术是基于DNA/蛋白质或RNA/蛋白质复合物在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中有不同迁移率的原理。首先让蛋白质与末端标记的核酸探针结合,然后在跑PAGE胶,结合了蛋白质的复合物比未结合蛋白质的探针电泳的速度要慢,这样,从PAGE胶的电泳结果就可以判断,该蛋白是否和特定序列结合或者该序列是否和蛋白结合。
  通过电泳迁移率的变化来进行定性和定量分析,EMSA实验(凝胶/电泳迁移率实验)基于素标记探针与对应的DNA结合蛋白的特异性结合,设计合理、科学的实验方案,为客户提供验证性的EMSA,竞争性的EMSA以及超迁移EMSA(Super-shiftEMSA)实验服务。
  1、细胞核蛋白或纯化的转录因子,部分实验亦可使用重组表达的蛋白,依据实验设计每张膜至少提供50ul,浓度大于0.5mg/ml。
  2、探针序列,如无探针序列,请提供DNA结合蛋白相关信息或相关文献,便于技术人员设计探针。
  3、结合蛋白特异性抗体50ul以上,浓度大于0.5mg/ml。