实验流程
1.试剂准备
1.1.实验前应用力振荡几次预分装深孔板，避免液体残留在封口膜上。检查溶液是否有沉淀，磁珠是否能重悬。
2.操作步骤
2.1.根据不同样本类型选择对应步骤进行处理
A.病毒、支原体、衣原体类核酸提取：取200~300 μL液体样本、20 μL蛋白酶K直接加至预分装深孔板第1/7列的孔中，按照步骤2.4操作直接上机提取，无需进行前处理。
B.非真菌类、易裂解微生物核酸提取：取350~400 μL液体样本至研磨管中，加入40 μL裂解加强液、20 μL蛋白酶K,高速涡旋1分钟混匀。
易裂解细菌：革兰氏阴性菌如大肠杆菌、流感嗜血杆菌、嗜肺军团菌、百日咳杆菌等。
C.真菌类、难裂解微生物核酸提取：取350~400 μL液体样本至研磨管中，再加入40 μL裂解加强液、20 μL蛋白酶K，在涡旋仪最大转速涡旋30分钟或转移至震荡破碎仪高速研磨样本10分钟(不同品牌震荡破碎仪，请选择仪器推荐程序)。
真菌：白假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、黄曲霉、青霉菌。
难裂解细菌：革兰氏阳性菌如葡萄球菌、霉菌、肺炎链球菌等。
注意事项：
拭子类保护液可能含有高浓度胍盐，会与裂解加强液反应导致提取效果不佳；如确需提取该类样本，无需加入裂解加强液，步骤2.1处理完后，按照步骤2.4继续操作。
全血样本：如脐带血，骨髓血这些细胞含量高的全血，提取过程中可能会出现磁珠残留或颜色残留，建议将样本用生理盐水或PBS稀释后再进行核酸提取，或联系厂家推荐其它试剂和方案。
痰液样本：提取过程中容易出现磁珠残留，建议将样本用生理盐水或PBS稀释后再进行核酸提取。
2.2.转至水浴锅或干式恒温仪中，70℃温浴20分钟进一步裂解样本，裂解后取出涡旋混匀30秒。
2.3.若裂解后溶液出现浑浊，10,000×g离心1分钟；若裂解后溶液清澈透明，瞬时离心30秒即可。
备注：如木霉菌等真菌离心后上清有颜色，可额外购买我司沉淀液SPS，按以下流程操作：取300 μL离心后上清到新的离心管中，加入100 μL沉淀液SPS混匀后，4℃冰浴10分钟，10,000×g离心3分钟后取上清上机。
2.4.对于32通道全自动核酸提取仪 （仪器型号：Mypure 32）
2.4.1.把预分装深孔板平放于桌面，轻轻拍打几下让孔壁上的液滴滴回孔中，小心去除封口膜。
2.4.2.吸取200~300 μL步骤2.3的上清溶液，加入预分装深孔板第1/7列的孔中，小心吸取，避免吸到沉淀或玻璃珠，每块预分装深孔板可以处理16个样本。
2.4.3.将深孔板放入核酸提取纯化仪的底座卡位上，在磁棒套卡槽中插入8联磁棒套，选择“病原微生物总核酸提取"程序，依次点击打开-准备运行进行提取。
注意：即使只提取1个样本，也需要装上2个8联磁棒套，以避免磁棒直接接触试剂。
注意：保持深孔板以第1列在左，第12列在右的方向放入底座卡位，如放置错误，无法获得核酸。
2.4.4.提取的核酸在第6/12列的孔中，如果不立即使用，请转移至1.5 mL无菌无核酸酶的离心管中，存储于-15~-25℃，长期保存请放置于-70℃或更低的温度。
注意：在进行下游PCR或QPCR检测前，对于双链RNA病毒如轮状病毒、传染性胰坏死病毒、传染性法氏囊病病毒、果蝇的X病毒、双瓣软体动物的Tellina病毒(TV)和牡蛎病毒(Oyster virus，OV)等，建议先将双链RNA经90℃变性5分钟后，迅速降温至4℃，再进行逆转录及后续PCR。
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